Подвижническая жизнь прп. Иова прошла на далекой юго-западной окраине русской земли, которая в то время входила в состав Польско-Литовского королевства. Это были тяжелые годы гонения на Православие католиками и униатами. Родился он в благочестивой, вероятно, дворянской семье в 1550 году в Галиции и назывался в миру Иоанн Железо. В отроке очень рано проснулось стремление к иноческой жизни. В возрасте 10 лет он поступил в Угорницкий монастырь. В этом раннем возрасте он так преуспел в иноческих подвигах, что в 12 лет был уже пострижен в мантию с именем Иова, по достижении совершенного возраста возведен в священнический сан, а тридцати лет удостоен великой схимы, причем ему было возвращено имя Иоанн. Он особенно любил это имя и всегда им подписывался, но к лику святых он был причислен с именем Иова.
Слава о его подвижнической жизни распространилась по всей Галиции и Волыни. И вскоре по просьбе могущественного защитника Православия князя Константина Острожского св. Иов возглавил Крестовоздвиженский монастырь около г. Дубно, где в течение 20 лет он был настоятелем и много писал в защиту православия. Прп. Иов вел большую просветительскую деятельность, ибо она была в то время главным средством борьбы православных юго-западной церкви с католиками. Именно тогда, при нем, в типографии князя Константина была напечатана Иваном Федоровым знаменитая Острожская Библия (первая полная славянская библия). Под его руководством выполнялись переводы святоотеческих творений на славянский язык. Недовольство по поводу его просветительской деятельности со стороны католиков и униатов заставило его около 1604 года тайно покинуть монастырь и перейти на св. Почаевскую гору в поисках места для аскетических подвигов, в Свято-Успенский Почаевский монастырь, издавна известный своей чудотворной иконой Божией Матери «Почаевской», принесенной туда в 1537 году греческим митрополитом Неофитом. Еще в 1597 году Почаевскую обитель основательно перестроила ревнительница Православия помещица Анна Гойская. Она много сделала для обители, подарив ей луга и угодья для сенокоса. Здесь прп. Иов для молитвенных подвигов удалился в каменную пещеру. Но вскоре братия избрала его своим настоятелем. Прп. Иов был кроток и ласков с братией, сам много работал в саду, укреплял плотину близ обители. При нем началась активная строительная деятельность: возведены новые монастырские стены, построен Свято-Троицкий собор, а затем еще шесть церквей. Он был делателем непрестанной молитвы Иисусовой — «Господи, Иисусе Христе, помилуй мя, грешнаго», доводящей подвижника до высоких духовных степеней. Вот что о нем повествует его ученик и сподвижник Досифей, ставший по его кончине его преемником по игуменству. «Однажды, когда молился преподобный в той пещере, вдруг облистал его свет благодати Божией, сиявший по всей церкви в течение двух часов непрестанно. Я же, увидев его, в великом ужасе пал на землю, побежденный таким чудным видением».
Много скорбей принес преп. Иову наследник Анны Гойской лютеранин Фирлей. Он завладел монастырскими землями и даже чудотворной иконой. Но св. икона была возвращена монастырю после того, как жену Фирлея постигло за кощунство над ней Божие наказание, а земли были возвращены судом незадолго до кончины преподобного.
Скончался преп. Иов в 1651 году в возрасте более 100 лет, после 50-летнего управления Почаевской обителью. Мощи его были открыты в 1659 году после трехкратного его явления митрополиту Киевскому Дионисию.
В 1721 г. Почаевским монастырем завладели униаты. Чудотворную икону Божией Матери они чтили, но доступ к мощам преподобного для верующих закрыли. Однако же через 20 лет чудеса св. Иова заставили их допустить к ним верующих.
В 1831 г. униаты были воссоединены с Православной Церковью. Мощи преподобного были вновь торжественно открыты, а Почаевский монастырь объявлен Лаврой. Возле его святых мощей и сейчас происходит множество исцелений болящих самыми тяжкими недугами. Открытые руки прп.Иова, к которым прикладываются верующие, теплые, мягкие и источают благоухание.
